Profilování genové exprese na úrovni jednotlivých buněk a kontrola kvality ; Single cell gene expression profiling and quality control

Single cell gene expression profiling and quality control David Švec Institute of Biotechnology AS CR, Laboratory of Gene Expression, Prague, Czech Republic TATAA Biocenter, Research & Development, Gothenburg, Sweden Abstract: Gene expression profiling has become an exceedingly important tool for describing occurence of mRNA in tissue samples and even single cells. Most often we use it for characterization of cell types, degree of differentiation and pathology on a molecular level. In our newly established laboratory, we developed high resolution qPCR tomography to show distribution of tens of maternal mRNAs within a single oocyte. We demonstrated that distribution of mRNAs has an important role in further development of the organism. For high resolution qPCR tomography, where one oocyte is divided in tens of samples and about fifty genes are studied in each sample, we optimized dye based protocol for microfluidic high-throughput platform BioMark. Next step was complementing the molecular profile of tens most important genes with information about histology of each selected tissue section using laser microdissection. As a model we used embryonic development of mouse molar. Our goal was to describe interaction of up to one hundred genes in different stages of development and on the single cell level. This. ; Profilování genové exprese na úrovni jednotlivých buněk a kontrola kvality David Švec Biotechnologický ústav AV ČR, Laboratoř genové exprese, Praha, Česká republika TATAA Biocenter, Výzkum & vývoj, Göteborg, Švédsko Abstrakt: Profilování genové exprese je velmi důležitý nástroj, který umožňuje získat informaci o výskytu mRNA ve vzorku tkáně či v jednotlivých buňkách. Slouží k charakterizaci typů buněk, stanovení stupně diferenciace i ke studiu jejich patologického stavu na molekulární úrovni. V naší nově založené laboratoři jsme vyvinuli qPCR tomografii s vysokým rozlišením odhalující distribuci maternálních mRNA v rámci jednoho oocytu. Distribuce mRNA v embryu je důležitá pro pochopení následujícího ...