Changes in platelet proteome and kinase activity upon platelet activation with ionomycin ; Veränderungen im Proteom von Blutplättchen und der Kinaseaktivität nach Plättchenaktivierung durch Ionomycin

Plättchen spielen sowohl physiologisch eine kritische Rolle, insbesondere in der Blutgerinnung, als auch in diversen pathologischen Prozessen, wie Atherosklerose, der Regulierung von Entzündungen oder der Neubildung von Blutgefäßen. Plättchen liegen üblicherweise in einem inaktiven Zustand im Blutgefäßsystem vor. Sie können durch eine Vielzahl von Reizen aktiviert werden, erfahren dabei sowohl physische als auch morphologische Veränderungen und sezernieren eine Vielzahl von Proteinen, die in Vesikeln gelagert werden. Das Ziel dieser Arbeit war es die Gesamtheit der Proteine (=Proteom) von Plättchen aus gesunden erwachsenen Menschen in einem bottom-up shotgun-proteomic Ansatz zu untersuchen, und die Effekte des Aktivators Ionomycin zu analysieren. Dazu wurde auch das Phosphoproteom von Plättchen-Lysaten untersucht, indem die phosphorylierten Peptide mittels TiO2-Beads angereichert wurden. Dabei wurden insgesamt 3125 Proteine im Secretome als auch im Plättchen-Lysat identifiziert von denen 1547 einer signifikanten Regulierung nach Plättchenaktivierung unterliegen. Tendenziell wurde eine Zunahme der Kinaseaktivität der Kinasen aus der ACG Kinase Familie als auch der Kinasen aus der CAMK Familie beobachtet. MAP-Kinase und die Kinasen weiter downstream, wie zum Beispiel ERK, zeigen tendenziell eine Abnahme der Kinaseaktivität. Eine Gene Ontology Analyse zeigt einen signifikanten Einfluss in diversen Pathways von Proteinen die ausschließlich im Secretome detektiert wurden und nach der Plättchenaktivierung hochreguliert wurden. Das Verständnis der (phospho-)proteomischen Regulationen in Plättchen von gesunden Probanden kann als Grundlage für gezielte künftige Therapiemöglichkeiten in den Bereichen der Herzkreislauferkrankungen oder Krebs dienen. ; Platelets play critical roles in physiological (particularly hemostasis) and pathological processes such as regulation of inflammation, angiogenesis, as well as atherosclerosis. They usually circulate in the blood stream in an inactive state. Upon activation through various ...