Distinct mode of action of a highly stable, engineered phage lysin killing Gram-negative bacteria ... : طريقة عمل متميزة من ليسين عاثية هندسية مستقرة للغاية تقتل البكتيريا سالبة الجرام ...

Therapeutic options to treat bacterial infections caused by Gram-negative pathogens are limited due to the spread of multidrug resistance. Protein engineering of phage-derived lysins can play a key role in the search for new antimicrobial compounds targeting Gram-negative pathogens. A previous high-throughput screen of a combinatorial lysin library identified lysin 1D10 active against Acinetobacter baumannii under elevated human serum concentrations. The engineered lysin consists of four modules: cecropin A, a linker, cell wall-binding domain, and an enzymatic active domain. Using time-lapse microscopy, we show that 1D10 has a distinct antibacterial mode of action resulting in local cell wall bulging at the septum instead of cell-wide lysis, as observed for previously reported engineered lysins that target Gram-negative bacteria. Our results indicate that the activity of 1D10 relies on the antibacterial activity of both cecropin A (CecA) and the enzymatically active domain. Based on a truncation ... : الخيارات العلاجية لعلاج الالتهابات البكتيرية التي تسببها مسببات الأمراض سالبة الجرام محدودة بسبب انتشار المقاومة للأدوية المتعددة. يمكن أن تلعب هندسة البروتين الخاصة بالليسينات المشتقة من العاثيات دورًا رئيسيًا في البحث عن مركبات جديدة مضادة للميكروبات تستهدف مسببات الأمراض سالبة الجرام. حددت شاشة سابقة عالية الإنتاجية لمكتبة الليسين التوافقية أن الليسين 1 فصّ10 نشط ضد البكتيريا الخاملة بومانية تحت تركيزات مصل بشرية مرتفعة. تتكون الحالة المهندسة من أربع وحدات: cecropin A، ورابط، ومجال ربط جدار الخلية، ومجال نشط إنزيمي. باستخدام المجهر الزمني، نظهر أن 1 فصّ10 له نمط عمل مضاد للبكتيريا متميز مما يؤدي إلى انتفاخ جدار الخلية المحلي عند الحاجز بدلاً من التحلل على مستوى الخلية، كما لوحظ في حالات الليسينات المهندسة التي تم الإبلاغ عنها سابقًا والتي تستهدف البكتيريا سالبة الجرام. تشير نتائجنا إلى أن نشاط 1 فصيلة 10 يعتمد على النشاط المضاد للبكتيريا لكل من cecropin A (CecA) والمجال النشط إنزيميًا. استنادًا إلى تحليل الاقتطاع، تم تشريح دور كل وحدة من الوحدات الأربع لـ 1 فصّ10. كما قارنا الطيف المضاد للبكتيريا، وثبات ...