Expression and internalization analysis of nutrient transporters in mammalian cells ; Análise da expressão e internalização de transportadores de nutrientes em células de mamífero

Dissertação de mestrado Genética Molecular ; Vários são os transportadores de nutrientes cruciais para o correto desenvolvimento e adequada manutenção do organismo. Neste estudo focamo-nos em dois grupos, os transportadores de ácidos monocarboxílicos (MCTs) e os transportadores de cobre (CTRs). Os primeiros – MCTs - são responsáveis pelo influxo e / ou efluxo de ácidos monocarboxílicos das células, como o lactato. Uma elevada percentagem de tumores produz energia via glicólise, um processo denominado efeito Warburg, que resulta na elevada produção de lactato, e exportação deste por meio dos MCTs. Por sua vez, o lactato exportado fornece-lhes a capacidade de proliferar e aumentar a malignidade do tumor. As células de Sertoli também mantêm uma elevada taxa glicolítica e de exportação de lactato, que é posteriormente importado pelas células germinativas masculinas. Contudo, estas células não demonstram os fenótipos cancerígenos associados a este metabolismo semelhante ao efeito Warburg. O MCT4 é um dos dois MCTs cuja sobre expressão está presente numa grande variedade de cancros, para além de ser um elemento-chave no exporte de lactato das células de Sertoli. Assim, um dos objetivos deste trabalho consistiu na comparação da expressão e do tráfego do MCT4 em células cancerígenas versus células de Sertoli. E assim, detetamos que após tratamentos de hipoglicemia ou na ausência total de glicose, o MCT4 é internalizado na linha celular PC-3, e em resposta a tratamentos de concentração fisiológica de glucose ou hiperglicémicos a sua localização na membrana plasmática é mantida. No entanto, na linha celular de Sertoli TM4, o MCT4 não parece ser internalizado. Para além disso, a expressão proteica do MCT4 não varia significativamente quer entre tratamentos, quer entre linhas celulares. No entanto, são necessários estudos adicionais para melhor caracterizar o tráfego do MCT4 nestas linhas celulares. O cobre (Cu) é um ião metálico que desempenha um papel crucial em todos os seres vivos, atuando como cofator de várias enzimas ...