Avaliação do Potencial Protetor do Acetato de Segesterona e da Sinvastatina em um Modelo In Vitro de Isquemia Cerebral

O Acidente Vascular Cerebral Isquémico (AVCI) ocorre quando o fluxo sanguíneo cerebral é interrompido ou diminuído devido à obstrução de uma artéria, levando consequentemente a danos no tecido cerebral. Quando não revertido rapidamente, o AVCI leva a sequelas duradouras que podem comprometer as funções motoras, cognitivas e emocionais do doente. Em lesões graves, os tratamentos existentes não são eficazes na reversão dos danos causados pelo evento isquémico, sendo crucial o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Com o presente trabalho, pretendemos avaliar o potencial efeito neuroprotetor dos fármacos acetato de segesterona, um potente agonista do recetor da progesterona, e a sinvastatina, uma estatina com ação antioxidante, num modelo in vitro de AVCI, e testar a segurança de duas novas formulações (nanoemulsão e microemulsão) para o acetato de segesterona. Para o efeito, foram usadas como modelo de AVCI culturas de córtex de rato submetidas a privação de oxigénio e de glucose. Numa primeira fase, otimizámos o modelo celular de forma a obter uma percentagem de morte celular que permitisse detetar possíveis efeitos protetores dos fármacos em estudo. A citotoxicidade foi avaliada pelo ensaio de redução do sal de tetrazólio. Posteriormente, otimizámos as condições de cultura de forma a eliminar possíveis ações protetoras endógenas, que pudessem camuflar a ação protetora dos compostos em estudo. Com este objetivo, procedemos à remoção do soro da cultura e testámos a lesão isquémica em culturas enriquecidas em neurónios, para eliminar a ação protetora dos astrócitos. Apesar destas estratégias conduzirem ao aumento da morte celular, a análise da viabilidade celular com o ensaio MTT (do inglês, Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide) não demonstrou efeito protetor do acetato de segesterona ou da sinvastatina em nenhuma das concentrações testadas (0,001 mM a 10000 mM para o acetato de segesterona e 0,1 mM a 10000 mM para a sinvastatina), sugerindo que o efeito protetor destes compostos, observado em estudos in ...