Immunology and genetics in nonhuman primates: Study of KIR3DL02 interaction with MHC-class-I ligands of rhesus macaques ; Imunologia e genética em primatas não-humanos: Estudo da interação de KIR3DL02 com ligandos MHC-classe-I de macacos rhesus

Dissertação de Mestrado em Investigação Biomédica apresentada à Faculdade de Medicina ; Células natural killer (NK) são linfócitos capazes de matar células alvo infectadas ou transformadas por vírus. A ativação da lise de células alvo pelas células NK é mediada pelos receptores presentes nestas células. Um grupo importante de receptores são os receptores tipo imunoglobulina das células killer (KIR), sabe-se que estes ligam a membros da família polimórfica de moléculas MHC-classe-I. O macaco rhesus foi considerado um modelo animal primata não-humano de grande importância para doenças infeciosas nos humanos. Durante infecção experimental com o vírus da imunodeficiência símia (SIV), foi estabelecida uma conexão entre a presença de certos KIR e alelos MHC-classe-I com maiores ou mais baixos níveis virais, e consequentemente com uma mais rápida ou mais lenta progressão da doença. Curiosamente, foi demonstrado que a expressão de KIR3DL02 está associada com níveis virais mais baixos em animais em ensaios experimentais de infecção. Contudo, as especificações da interação entre KIR3DL02 e ligandos de MHC-classe-I são desconhecidas. O objetivo do presente trabalho, foi, por um lado, estudar a interação entre KIR3DL02 e certos alelos de Mamu, através do uso de proteínas recombinantes de KIR-Fc multimerizadas para marcar células que expressam Mamu. Para além disto, de modo a expandir o espectro de futuros estudos de interação, novos alelos de Mamu foram amplificados de cDNA de macaco rhesus e clonados em vectores de expressão de mamíferos. O trabalho aqui descrito permitiu a otimização dos estudos de ligação com o uso de proteínas KIR-Fc de fusão e células K-562 transfectadas com Mamu AcGFP. Identificação de potenciais ligandos para KIR3DL02 assim como construção de novos vectores de expressão de Mamu foram conseguidos com sucesso. Contudo, é necessária a realização de mais estudos para averiguar os resultados aqui descritos e para estudar a interação entre KIR3DL02 e os novos alelos de Mamu amplificados, com especial ...