Strukturbiologische Untersuchungen von Anticalin/Ligand-Komplexen ; Structural investigations on Anticalin/Ligand Complexes

Die Kristallstrukturen von zwei künstlichen Bindeproteinen (Anticalinen) wurden im Komplex mit ihrem jeweiligen Liganden analysiert. Ein Ligand war Hepcidin, ein durch vier Disulfidbrücken quervernetztes 25mer Peptid. Es zeigte sich, dass 14 der 21 Reste, die in der zur Selektion des Anticalins verwendeten Zufallsbibliothek randomisiert waren, mit dem Liganden interagieren, was die Tauglichkeit der Mutagenesestrategie unterstreicht. Der andere Ligand war der vaskuläre endotheliale Wachstumsfaktor (VEGF). Dieses Anticalin zeigte eine geänderte Anordnung der beta-Stränge gegenüber dem natürlichen Lipocalin-Gerüst. Dies machte sich vor allem in der Ausbildung eines psi-Loops bemerkbar, der durch eine im Verlauf der Zufallsmutagenese neu eingeführte Disulfidbrücke und einen Cluster von hydrophoben Seitenketten stabilisiert wird. ; The crystal structures of two artificial binding proteins (Anticalins) were analyzed in complex with their ligands. The first ligand was hepcidin, a 25mer peptide with four disulfide crosslinks. It was found that 14 of the 21 residues that were randomized in the library used for the selection of the Anticalin interact directly with the ligand, thus confirming the validity of the mutagenesis strategy. The second ligand was the vascular endothelial growth factor (VEGF). The structure of this Anticalin revealed a different arrangement of the beta-strands compared to the natural lipocalin scaffold. The most prominent change was the formation of a psi-loop, which is stabilized by a disulfide bond resulting from the randomization as well as a cluster of hydrophobic side chains.