Nachweis und Charakterisierung von Hepatitis-E-Viren und Cosaviren in Umweltproben ; Detection and characterization of hepatitis E viruses and cosaviruses in environmental samples

Durch die Überwachung von humanpathogenen Viren in der Umwelt können Infektionsgeschehen in der Bevölkerung kontrolliert sowie mögliche Übertragungen über die Umwelt abgeschätzt werden. In der vorliegenden Arbeit war das Vorkommen von Hepatitis-E-Viren (HEV) und Cosaviren (CoSV) in Umweltproben in Deutschland von hauptsächlichem Interesse. Das Vorhandensein der beiden zoonotischen RNA-Viren wurde vor allem im Berliner Raum untersucht. Für den Nachweis von HEV in Abwasser- und Oberflächengewässerproben eigneten sich Proben ohne Aufkonzentrierung (Direktproben) sowie via Ultrazentrifugation (UZ) aufkonzentrierte Proben am besten. Cosaviren hingegen ließen sich am besten in Proben, die mittels UZ oder Polyethylenglykol (PEG)-Fällung aufkonzentriert wurden, detektieren. Die ermittelten Viruskonzentrationen werden von der verwendeten Aufkonzentrierungsmethode beeinflusst. Beim Vergleich verschiedener Studien sollten die Ergebnisse daher immer im Zusammenhang mit dem Verfahren der Aufkonzentrierung bewertet werden. Während der einjährigen Abwasserüberwachung einer Berliner Kläranlage wurden durchschnittliche HEV-Konzentrationen von 2x10^4 Kopien/100 ml (Direktproben) beziehungsweise 4x10^3 Kopien/100 ml (UZ-Proben) in den Zulaufproben mittels RT-qPCR quantifiziert. In den korrespondierenden Ablaufproben war die Konzentration an HEV mindestens um 1 Log10-Stufe reduziert. In den Sommermonaten wird der Ablauf der Kläranlage zusätzlich mit UV-Licht desinfiziert, wodurch die Viruseliminierung noch gesteigert wird. Besonders deutlich zeigte sich der Desinfektionseffekt im Lebendnachweisverfahren von Phagen. In mit UV-Licht bestrahlten Kläranlagenablaufproben waren alle somatischen Coliphagen und F+-spezifischen RNA-Phagen inaktiviert. Die quantitative PCR hingegen stellt kein geeignetes Verfahren dar, um das Vorhandensein von aktiven Viren in Wasserproben nach einer UV-Desinfektion zu bewerten, da die Nukleinsäuren weitgehend erhalten bleiben. Cosaviren wurden in den monatlichen Kläranlagenzulaufproben insgesamt in ...