Label-free microscopic bioimaging by means of confocal Raman spectroscopy on living glioblastoma cells ; Markerfreie mikroskopische Bildgebung mittels konfokaler Raman-Spektroskopie an lebenden Glioblastomzellen

The present thesis evaluates the possibility of noninvasive label free imaging on living cells by means of Raman microspectroscopic mapping. Here, after Raman measurements on living cells, immunofluorescence (IF) imaging served as a reference and helped to derive spectral patterns from Raman datasets. This allowed a clear identification of five intracellular comparments.With these patterns, artificial IF images (aIF) could be generated from Raman data, which can illustrate all five organelles only from the Raman spectral data. The feasibility of Raman spectroscopy to capture specific alternations in living cells, without changing the specimen itself, make the method highly interesting for investigations in molecular pathology. ; In der vorliegenden Arbeit wird Raman Spektroskopie als bildgebendes Verfahren auf subzellulärem Niveau genutzt, welches ohne vorbereitende Verfahren an lebenden Zellen eingesetzt werden kann. Nach Raman-Messungen an lebenden Zellen führten wir als Referenz Immunfluoreszenzmikroskopie (IF) durch. Aus beiden Bildsätzen wurden spektrale Muster für fünf verschiedene Organellen errechnet, und hieraus wurden artifizielle IF-Bilder für jedes der Organellen auf dem Raman-Datensatz rekonstruiert. Raman-Spektroskopie bietet eine Möglichkeit, spezifische Veränderungen in lebenden Zellen zu erfassen, ohne diese selbst zu verändern.