Optimization of Polymerase Chain Reaction for the detection of the B1 gene of T. gondii ; Optimización de la Reacción en Cadena de la Polimerasa para la Detección del gen B1 de T. gondii

Objective: This study aimed at optimizing the amplification conditions of the B1 gene (35 copies in the ge­nome) of T. gondii in cases of possible brain toxoplasmosis. Materials and methods: DNA was extracted from the peritoneal exudate of mice inoculated with the RH strain of T. gondii. Total exudate volume was 17 mL with a concentration of 1x107 parasites/mL. PCR conditions for the B1 gene were further optimized.Results: Serial dilutions from 1x106 to 1x10-1 parasites/mL were needed for amplifying a fragment of 132 bp . This set the detection limit for 1 T. gondii tachyzoite. ; Optimizar las condiciones de amplificación del gen B1 (35 copias en el genoma) para la detección de ADN de T.gondii en casos probables de toxoplasmosis cerebral. Materiales y métodos: Se realizó extracción de ADN a partir de exudado peritoneal de ratones inoculados con la cepa RH de T. gondii obteniendo 17 mL con una concentración inicial de 1x107 parásitos/mL. Se optimizaron las condiciones de PCR del gen B1. Resultados: Se obtuvo amplificación de un fragmento de 132 pb a partir de ADN obtenido de diluciones seriadas desde 1x106 a 1x10-1 parásitos por mL, estableciéndose un límite de detección de 1 taquizoíto de T. gondii.