Impacto da deleção de GPP2 sobre o processo de autofagia em Cryptococcus neoformans ; Impact of GPP2 deletion on autophagy process in Cryptococcus neoformans

A criptococose é uma micose de caráter sistêmico de grande importância clínica. A doença é causada, sobretudo, pelas espécies dos complexos Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii, esses fungos patogênicos, onipresentes e oportunistas causam infecção pulmonar, cutânea, renal, esplenomegalia e, mais importante dada a letariedade, a meningoencefalite. A criptococcose acomete, principalmente, pacientes com sistema imunológico debilitado. Durante a infecção, a levedura precisa se adaptar às condições desfavoráveis no hospedeiro como a alta temperatura (37° C) e a disponibilidade de nutrientes. O tratamento dessa micose compreende o uso prolongado de antifúngicos que, em sua maioria, são tóxicos para o paciente e o uso constante desses medicamentos induz o surgimento de cepas resistentes. Dessa forma, novas terapias antifúngicas são necessárias para aumentar as opções de tratamento. A autofagia atua como um sistema de degradação e reciclagem intracelular de macromoléculas e organelas que garante a homeostasia e a sobrevivência da célula diante de diferentes fatores de estresse. Análises de transcriptoma RNAseq em meio rico (YPD) em C. neoformans mostram que a deleção do gene GPP2 reprime e induz alguns genes chaves da autofagia tais como: ATG1, ATG2, ATG4, VPS15, ATG15, VPS30 e PEP4. Os nossos dados de qPCR validaram os resultados das análises de RNAseq. Trabalhos anteriores do nosso grupo mostraram que no mutante gpp2Δ ocorre a interrupção de várias vias biossintéticas e captação de aminoácidos que resulta na queda da viabilidade celular, incapacidade de lidar com vários tipos de estresses, redução da expressão de fatores de virulência, (melanina, fosfolipase e urease) e atenuação de virulência em Galleria mellonella, indicando que a biossíntese e absorção de aminoácidos sulfurosos é uma característica importante para a sobrevivência do patógeno in vivo e in vitro. Em Saccharomyces cerevisiae, o Gpp2 é induzido em resposta ao estresse hiperosmótico e oxidativo. Neste trabalho mostramos que em C. neoformans, ...