Keimzelltumore und Cisplatinresistenz: Bildung von DNA-Addukten, Auswirkungen auf Zellzyklus und Zelltod und Beteiligung von DNA-Reparaturmechanismen ; Germ cell cancer and cisplatin resistance: formation of DNA adducts, impact on cell cycle and cell death and involvement of DNA repair mechanisms

Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich mit der Frage, welche Mechanismen an einer Resistenz bzw. Resistenzentwicklung von Keimzelltumoren des Hodens gegenüber Cisplatin (CDDP) beteiligt sind. Die Untersuchungen erfolgten in vitro an den Embryonalkarzinomzelllinien NT-2 und ihrer generierten, CDDP-resistenten Sublinie NT-2-R sowie der Seminomzelllinie TCam-2. CDDP wurde in Anlehnung an die unterschiedlichen Therapieprotokolle über verschiedene Zeiten eingesetzt. Die Ergebnisse zeigen, dass die drei Zelllinien ganz unterschiedliche Resistenzniveaus aufwiesen und dass diese Unterschiede für kurze Inkubationszeiten ausgeprägter waren. Es waren zwischen den Zelllinien keine statistisch signifikanten Unterschiede in der Bildung der Platinaddukte zu beobachten. Unterschiede in der CDDP Aufnahme bzw. CDDP Eliminierung scheinen daher für die Unterschiede in der CDDP Empfindlichkeit keine Rolle zu spielen. Nach einer Kurzbehandlung über 3 h schienen NT-2-R-Zellen diese Addukte allerdings effizienter entfernen zu können als die NT-2-Zellen und auch effizienter als nach einer längeren Behandlungszeit. Eine CDDP-Behandlung induzierte in den NT-2-R-Zellen die Expression von ERCC1 und pol ß. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass diese Zellen versuchen, die DNA-Schäden zu reparieren, aber die Kapazität des Reparatursystems begrenzt ist. Sie lassen außerdem vermuten, dass eine erhöhte Schadenstoleranz eher an der Resistenzentwicklung und den Unterschieden zur Elternzelllinie NT-2 beteiligt zu sein scheint. Auch hier scheint die Kapazität begrenzt. Die bekannte Fehleranfälligkeit der pol ß könnte zu dieser verminderten Kapazität zusätzlich beitragen. In den TCam-2-Zellen wurde der höchste ERCC1-Gehalt gemessen. Der Gehalt dieses Proteins konnte in anderen Zellkulturmodellen sowie in Patientenzellen als Marker einer CDDP-Resistenz identifiziert werden. Die hier gewonnenen Ergebnisse unterstützen diese Vermutung. Die erhöhte ERCC1-Expression war allerdings nicht mit einer erhöhten Fähigkeit der Adduktentfernung assoziiert. Die ...