Molekularbiologische Untersuchungen zur polymorphen Expression von Cytochrom P450 3A5 in der humanen Niere ; Molecular biological analyses of the polymorphic expression of cytochrome P450 3A5 in the human kidney

In der aktuellen Literatur wird CYP3A5 als ein interessantes neues Kandidatengen für die Blutdruckforschung angesehen. Sowohl Ergebnisse aus der tierexperimentellen Grundlagenforschung als auch klinisch-prospektive Assoziationsstudien der letzten Jahre gaben Grund zu der Annahme, die mischfunktionelle Oxidase CYP3A5 habe neben ihrer Rolle in der hepatischen Fremdstoffmetabolisierung eine physiologische Bedeutung für die Blutdruckregulation. Mit der Entdeckung eines funktionellen Polymorphismus im CYP3A5-Gen konnten starke interindividuelle Schwankungen der Proteinexpression von CYP3A5 erklärt werden. Untersuchungen an Lebergewebe zeigten, dass ein einzelner Basenaustausch im Intron 3 des CYP3A5-Gens (6986A>G) zu alternativem Spleißen der prä-mRNA führt. Die unmittelbare Folge für den Translationsprozess besteht in einer Verschiebung des Protein-Leserasters mit Kreation mehrerer vorzeitiger Stoppkodons und damit einem Abbruch der Proteinsynthese. Daher zeigen Träger von mindestens einem Wildtyp-Allel (A-Allel, CYP3A5*1) eine deutliche Proteinexpression, während bei homozygotem Vorliegen des mutierten Allels (G-Allel, CYP3A5*3) nur sehr geringe Mengen funktionellen Proteins gebildet werden. Da CYP3A5 als einziges CYP3A-Isoenzym eine deutliche Expression in der humanen Niere zeigt, erscheint ein Einfluss des Polymorphismus auf die Blutdruckregulation plausibel. Entsprechende Untersuchungen an Studienpopulationen unterschiedlichen ethnischen Hintergrunds führten jedoch bislang zu widersprüchlichen Ergebnissen. Die vorliegende Arbeit sollte daher die Genotyp-Phänotyp-Assoziation von CYP3A5 in menschlichem Nierengewebe beschreiben und weitere Erkenntnisse zu einem möglichen Einfluss auf die renale Blutdruckregulation hinzufügen. Dazu wurden zunächst n=102 Nierenproben eines kaukasischen Kollektivs hinsichtlich des 6986A>G-SNP im CYP3A5-Gen genotypisiert und anschließend der Gehalt an korrekt gespleißter CYP3A5-mRNA für jedes Individuum mittels Realtime-PCR quantifiziert. Es konnte eine klare Abhängigkeit der ...