Avaliação do Ficol como crioprotetor de ovócitos imaturos com posterior descongelação, maturação e fecundação in vitro

Relatório de Estágio apresentado à Escola Superior Agrária do Instituto Politécnico de Castelo Branco para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Engenharia Zootécnica. Os objetivos do presente trabalho foram a avaliação da capacidade de fecundação in vitro e posterior desenvolvimento até ao estado de mórula compacta/blastocisto após congelação/descongelação de ovócitos imaturos bovinos, recorrendo ao ficol como crioprotetor. Desta forma foram então utilizados um total de 134 ovários recolhidos no Matadouro dos quais foram puncionados 1245 cumulus complexos ovocitários (COCs) classificados com classe A e B sendo estes divididos em dois grupos de trabalho: Grupo 1 - Avaliação da toxicidade dos crioprotetores (n=691); Grupo 2 - Avaliação da vitrificação de ovócitos (n=554). Os ovócitos pertencentes ao Grupo 1 foram usados para a avaliação do Ficol como crioprotetor sendo os resultados avaliados pela taxa de desenvolvimento nuclear após a sua maturação. Após observar que o Ficol não é toxico para os COCs, foi desenvolvida a segunda parte do trabalho (Grupo 2), onde após a descongelação, os ovócitos foram fecundados in vitro sendo avaliado o estado de desenvolvimento embrionário. No que concerne aos resultados da expansão das células do cumulus oophurus, observou-se uma menor taxa de expansão dos cumulus dos ovócitos submetidos ao meio de vitrificação contendo apenas DMSO (88,7±2,6), quando comparados com os resultados do DMSO + Ficol (91,8±2,2) (p