Propuesta de ensayo de identidad del componente polisacarídico de la vacuna antimeningocócica cubana VA-MENGOC-BC mediante aglutinación de látex.

Proposal of an identity test for the polysaccharide component of the Cuban meningococcal vaccine VA-MENGOC BC using the latex agglutination assay.

The World Health Organization and the National Control Authorities establish the identity test as a requirement to be fulfilled by all the lots of a final vaccine. Immunological methods are generally recommended because of their high specificity and sensitivity. Although the latex agglutination test is rapid, simple, sensitive and specific is not mentioned for those purposes in the existing requirements where flocculation, agglutination with specific antisera, ELISA, immunoblot and others are recommended. However, it is commonly used in diagnosis and many kits are commercially available. This paper describes the identification of Neisseria meningitidis serogroup C polysaccharide that is a component of the Cuban meningococcal vaccine VA-MENGOC BC®, by means of the latex agglutination test using latex kits intended for meningitis diagnosis. Ten lots of the vaccine were evaluated. The active principle of the product (outer membrane vesicles from N. meningitidis serogroup B together with polysaccharide C) was previously separated from the adjuvant and submitted to the test in parallel with the positive control of the kit and a reference polysaccharide C. Positive agglutination was only observed with the reagent for serogroup C; the sensitivity was equivalent to that reported by the manufacturer (50 ng/ml) and inhibition due to antigen excess did not occur in the range of polysaccharide concentration of the vaccine. The assay was rapid, simple, sensitive and very specific, therefore it is recommended for the evaluation of the identity of the polysaccharide C component of VAMENGOC-BC® and could also apply to other polysaccharide-containing vaccines such as Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae and Salmonella typhi Vi. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

La Organización Mundial de la Salud y las Autoridades Regulatorias Nacionales establecen como requisito obligatorio para toda vacuna final el ensayo de identidad de los principios activos declarados en la misma. Para ello se recomiendan por lo general métodos inmunológicos, por su alta especificidad y sensibilidad, como las reacciones de floculación y aglutinación con antisueros específicos, ELISA e "immunoblot", entre otras. La técnica de aglutinación de látex en lámina es rápida, sencilla, sensible y específica, sin embargo no aparece particularmente reportada para estos fines, sino para el diagnóstico, para lo cual existen reactivos comerciales diversos. En el presente trabajo se describe la identificación del polisacárido de Neisseria meningitidis serogrupo C presente en la Vacuna Antimeningocócica Cubana VA-MENGOC-BC® mediante la aglutinación de látex en lámina, usando reactivos comerciales para el diagnóstico de meningitis, específicos para polisacáridos capsulares de los serogrupos A, B y C. Se evaluaron '10 lotes de vacunas a los que se les separó el principio activo (vesículas constituidas por proteínas de membrana externa del serogrupo B con polisacárido del serogrupo C) del adyuvante y se sometió al ensayo usando los reactivos de látex mencionados, paralelamente con su control positivo y diferentes diluciones de un polisacárido C de referencia, de concentraciones conocidas. Se obtuvo aglutinación solamente con el reactivo del serogrupo C, con sensibilidad coincidente con la reportada por el fabricante (50 ng/mL); no se observó inhibición por exceso de antígeno en el rango de concentraciones en que se encuentra presente el polisacárido en la vacuna. El método mostró ser rápido, sencillo, sensible y sobre todo específico, por lo que se recomienda su uso para el ensayo de identidad del polisacárido C presente en la vacuna final. Podría también ser útil en combinaciones de vacunas que tengan éste y otros componentes polisacarídicos, como Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae y Salmoneila tvphi Vi. [ABSTRACT FROM AUTHOR]